熱啟動(dòng)型 Taq DNA聚合酶(dNTP)說(shuō)明書(shū)

上海起發(fā)生物科技有限公司（Shanghai BioHub Biotechnology Co., Ltd.）屬于上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司（2009年成立）旗下的子公司，成立的初衷是建立上海起發(fā)生物自有品牌，打造優(yōu)質(zhì)的生物試劑民族自有品牌。降低成本的同時(shí)，把好生物產(chǎn)業(yè)鏈中的國(guó)產(chǎn)生物試劑品質(zhì)關(guān)。未來(lái)讓每一個(gè)和我們一樣擁有民族情懷的企業(yè)，共同創(chuàng)世界優(yōu)秀的中國(guó)生物制造企業(yè)，圓夢(mèng)中國(guó)。

產(chǎn)品詳情

產(chǎn)品描述

本酶為 HotStart Taq DNA 聚合酶，需 95 度加熱 5 分鐘或 98 度加熱 2 分鐘而激活。Taq DNA 聚合酶是大腸桿菌重組表達(dá)的嗜熱細(xì)菌 Thermus aquaticus 來(lái)源的熱穩(wěn)定型 DNA 聚合酶，分子量為 94 kDa。本酶經(jīng)特殊改造，具有良好擴(kuò)增能力和延伸速度，擴(kuò)增片段的長(zhǎng)度可達(dá) 5-6 kb，延伸速度為 2-3 kb/ min（72℃）。該酶具有 5’→3’聚合酶活性，較弱的 5’→3’外切酶活性；無(wú) 3’→5’ 外切酶活性。擴(kuò)增產(chǎn)物具有 3'-dA 尾巴。

產(chǎn)品應(yīng)用

1、熱啟動(dòng) PCR 擴(kuò)增

2、Multiplex PCR

3、菌落PCR

4、TA 克隆 PCR 產(chǎn)物添加 3’-dA

5、DNA 熒光標(biāo)記

活性定義

以大馬哈魚(yú)精子 DNA 作為模板/引物，在 72℃、30 min 內(nèi)，將 10 nmole 脫氧核糖核苷酸摻入到酸不溶物中所需的酶量，定義為一個(gè)活性單位（U）。

質(zhì)量控制

相關(guān)測(cè)試表明無(wú)外源內(nèi)切酶或外切脫氧核糖核酸酶污染。PCR 方法檢測(cè)無(wú)宿主殘余 DNA，能有效擴(kuò)增人基因組中的單拷貝基因。

室溫放置一周，擴(kuò)增活性無(wú)明顯改變；但強(qiáng)烈建議不要在室溫下長(zhǎng)期放置，用畢放回-20 度。

運(yùn)輸與保存

干冰運(yùn)輸。-20℃保存，有效期2年。

注意事項(xiàng)

為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作！

本產(chǎn)品主要用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

備注

1、本酶為熱啟動(dòng) Taq DNA 聚合酶，需 95 度加熱 5 分鐘或 98 度加熱 2 分鐘而激活；因此有利于提高擴(kuò)增的特異性，減少非特異性擴(kuò)增和引物二聚體，得到良好的PCR 結(jié)果。

2、Taq DNA 聚合酶具有脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶活性，因此在 PCR 產(chǎn)物 3’末端通常會(huì)加上 1 個(gè)多余的腺嘌呤。

3、對(duì)非熱啟動(dòng)酶而言，建議在冰上配置 PCR 反應(yīng)液后，再放入 PCR 儀中進(jìn)行擴(kuò)增。這有利于提高擴(kuò)增的特異性，減少非特異性擴(kuò)增，得到良好的PCR 結(jié)果。

4、堿基出錯(cuò)率是指在每個(gè)堿基合成過(guò)程中所摻入的錯(cuò)誤核苷酸數(shù)目。Taq DNA 聚合酶的堿基錯(cuò)誤率為 1×10-5。

5、如進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增后，除目的條帶外，還伴隨其他雜帶，建議提高退火溫度，或進(jìn)行梯度退火， 確定最佳退火溫度；同時(shí)可以適當(dāng)減少體系中的 Taq 酶用量，以增加 PCR 擴(kuò)增反應(yīng)的特異性。

6、本公司 Buffer 經(jīng)大量 PCR 反應(yīng)實(shí)例優(yōu)化而成，然而對(duì)某些PCR 反應(yīng)存在一個(gè)良好的鎂離子濃度。若需要優(yōu)化鎂離子濃度，請(qǐng)購(gòu)買本公司不含鎂離子的 buffer 和 MgCl2/MgSO4。